O Multiplexing Unique Dual Index Primers contém uma mistura de primers para multiplexar amostras para sequenciação de nova geração (NGS) na plataforma illumina. A multiplexagem de amostras de NGS reduzirá os custos de sequenciação ao agrupar várias bibliotecas de NGS numa única pista de célula de fluxo.
Desenvolvemos um sistema de índice de diferença de quatro bases. O sistema permite-nos criar índices com pelo menos 4 bases diferentes entre si no comprimento do índice de 8 bases. Os nossos primers de indexação dupla exclusivos eliminam erros de sequenciação, tais como index hopping, contaminação cruzada de índices, atribuição incorrecta de leituras, erros de amplificação e erros de desmultiplexagem.
Caraterísticas
Melhora a especificidade da identificação de amostras com o sistema de índice de diferença de 4 bases
Cada índice tem pelo menos 4 bases diferentes dos outros índices
a diferença de 4 bases aumenta consideravelmente a especificidade em comparação com a diferença de 3 bases dos outros fornecedores.
Aumenta a capacidade de multiplexagem
96 pares únicos pré-misturados de primers de índice i5 e i7
Minimiza os erros de sequenciação, tais como
Saltos de índice
Contaminação cruzada de índices
Atribuição incorrecta de leituras
Erros de amplificação
Erros de de-multiplexagem
Identificação do salto de índice por índice duplo único. foram criadas 96 bibliotecas utilizando o BioDynami NGS DNA Library Prep Kit e os BioDynami Multiplexing Unique Dual Index Primers . As bibliotecas foram agrupadas em concentrações iguais e sequenciadas no illumina HiSeq 4000. Os números de leituras de todas as bibliotecas foram desmultiplexados e analisados.
Demultiplexado: combinação correta dos índices i5 e i7
Index hopping identificado: códigos de barras corretos, mas NÃO a combinação correta de índices i5 e i7
Outros: não se enquadram nas categorias anteriores
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