Os NGS Library Quantification Standards with PCR Primers (para a plataforma illumina) foram desenvolvidos para a quantificação da concentração da biblioteca NGS para a plataforma de sequenciação illumina. É composto por Library Standards (seis diluições de 10 vezes) e uma mistura de primers.
A quantificação da biblioteca NGS das moléculas amplificáveis é fundamental para a qualidade dos dados de sequenciação. Uma concentração adequada da biblioteca maximizará a capacidade de sequenciação. Uma concentração deficiente da biblioteca resulta numa densidade de clusters baixa ou elevada na célula de fluxo, o que pode levar a uma capacidade de sequenciação reduzida.
Não é exato medir a concentração da biblioteca NGS com métodos padrão de quantificação de ADN, como o espetrofotómetro ou o fluorómetro. A QPCR é a melhor forma de quantificação da biblioteca com elevada consistência e reprodutibilidade da quantificação da biblioteca.
O nosso reagente é uma quantificação altamente sensível, baseada em PCR em tempo real, especificamente concebida para bibliotecas NGS que utilizam a plataforma de sequenciação illumina. A amplificação utiliza sequências do adaptador illumina como iniciadores e apenas as bibliotecas totalmente ligadas ao adaptador serão amplificadas. Por conseguinte, o reagente fornece uma estimativa exacta da concentração da biblioteca com base em bibliotecas illumina sequenciáveis verdadeiras. Além disso, este kit também pode ser utilizado para a confirmação da reação de ligação após a conclusão da preparação da biblioteca.
Os nossos padrões de quantificação de bibliotecas são compatíveis com reagentes comerciais de QPCR baseados em SYBR Green. Isto torna-o mais flexível para os cientistas que pretendem utilizar o seu reagente de PCR em tempo real. A quantificação da concentração da biblioteca é obtida por comparação com uma curva padrão gerada a partir dos padrões da biblioteca.
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