Reagente anticorpos RFP-Trap A

para bioquímicapara imagiologia celularde proteínas

Estas construções geralmente fundem a totalidade - ou pelo menos um domínio funcional - de uma proteína alvo com um dos muitos tipos de proteínas fluorescentes repórteres. As que derivam originalmente do cogumelo coral Discosoma sp. são normalmente designadas por proteína fluorescente vermelha, ou RFP. É fácil obter imagens de células utilizando uma construção de proteína de fusão RFP, embora para obter uma imagem completa esses dados de imagem sejam frequentemente combinados com informações bioquímicas adicionais para a proteína (ou domínio proteico) de interesse. Para essas experiências bioquímicas, é normalmente concebida uma segunda proteína de fusão utilizando um domínio "tag" diferente que permite a purificação. Estas análises in vitro adicionais podem ser utilizadas para confirmar a funcionalidade da construção de fusão "marcada", bem como para extrair complexos multiproteicos que se possam formar no meio celular. A falta de reagentes específicos, fiáveis e eficientes tem limitado a utilização de RFP e de proteínas de fusão fluorescentes relacionadas, tanto para estudos de biologia celular como para análises bioquímicas directas. As RFP-Traps utilizam fragmentos de anticorpos de alpaca de afinidade superelevada acoplados a esferas de agarose ou a esferas magnéticas de agarose. Estas "Nanobody-Traps" são perfeitas para experiências de imuno-precipitação, imuno-purificação e imuno-pulldown com uma pureza (e rendimento) até 10 vezes superior à dos anticorpos monoclonais de ratinho convencionais. Compatíveis com uma variedade de materiais de origem, os Nanobody-Traps podem ser utilizados com células, tecidos e órgãos de mamíferos, bactérias, leveduras e até plantas. Estes reagentes permitem que as suas fusões RFP sejam candidatas perfeitas para imunoprecipitações, Co-IP, espectroscopia de massa, medições da actividade enzimática e análise ChIP.