O kit Muse® Autophagy LC3-Antibody fornece uma solução quantitativa para o estudo da autofagia. Este kit contém dois reagentes de detecção essenciais para facilitar a monitorização de LC3-II lipidada num determinado sistema celular, e funciona da seguinte forma
Utilizando uma solução de permeabilização selectiva para discriminar a LC3 citosólica da LC3 autofágica, extraindo as proteínas citosólicas solúveis e protegendo a LC3, que foi sequestrada no autofagossoma
Utilização de um reagente de detecção de autofagia (Reagente de Autofagia A) para evitar a degradação lisossómica de LC3, permitindo a sua quantificação por citometria de fluxo
O kit Muse Autophagy LC3-Antibody based kit inclui um anticorpo monoclonal de ratinho anti-LC3 conjugado com Alexa Fluor® 555 para medir e monitorizar os níveis de LC3 na célula. O anticorpo conjugado anti-LC3 Alexa Fluor® 555 e os reagentes que permitem a autofagia foram cuidadosamente avaliados para garantir um desempenho óptimo, aliviando a necessidade de qualquer validação adicional dos reagentes do kit. Para além dos reagentes A e B, este kit inclui um tampão de ensaio para fornecer aos investigadores uma solução completa para a análise da autofagia. Os reagentes de detecção de autofagia e o anticorpo foram optimizados em conjunto para proporcionar uma forma fiável de medir e discriminar entre LC3 citosólica e lipidada, fornecendo medições precisas do processo autofágico. Os dados gerados utilizando o analisador de células Guava® Muse® juntamente com o módulo de software Muse correspondente fornecem valores estatísticos, medindo:
Valor médio de autofagia (para amostras de controlo e de teste)
Rácio de indução de autofagia (fluorescência da amostra de teste em relação ao controlo)
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