O kit Muse® Multi-Color DNA Damage - 50 Tests (Número de peça: MCH200107) foi concebido para permitir aos investigadores uma forma rápida e fácil de detectar a activação de ATM e H2A.X utilizando o analisador de células Guava® Muse®. O kit foi optimizado utilizando um reagente de danificação do ADN, o etoposido, em células HeLa como sistema modelo, mas pode ser utilizado com outras linhas celulares humanas para investigar os factores físicos e químicos que podem induzir uma resposta de danificação do ADN através da via de sinalização dependente de ATM. Os dados gerados utilizando o sistema Muse fornecem valores estatísticos, medindo o:
Percentagem de células negativas (por exemplo, sem danos no ADN)
Percentagem de células activadas por ATM
Percentagem de células activadas por H2A.X
Percentagem de quebras de cadeia dupla de ADN (activação dupla de ATM e H2A.X)
O kit Muse Multi-Color DNA Damage inclui dois anticorpos directamente conjugados - um anticorpo conjugado fosfo-específico ATM (Ser1981)-PE e um anticorpo conjugado fosfo-específico Histona H2A.X PECy5 - para medir a extensão dos danos no ADN em amostras de teste. Este kit de duas cores foi concebido para detectar o estado de fosforilação da ATM e da Histona H2A.X simultaneamente por análise de fluxo. Em conjunto, a análise a duas cores da activação da ATM e da Histona H2A.X em multiplex fornece um método de detecção mais fiável para avaliar a via de sinalização dos danos no ADN. Este par de anticorpos constitui uma ferramenta sensível e valiosa para estudar os factores que induzem danos no ADN e afectam a reparação do ADN, permitindo explorar a relação entre os danos no ADN, os pontos de controlo do ciclo celular e o início da apoptose.
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