Reagente meio reacional Biosci™

para pesquisa científicapara cultura celularde citometria de fluxo

A densidade das células mononucleares (linfócitos e monócitos) no sangue periférico situa-se entre 1,075-1,090g/ml, o que é diferente da densidade dos glóbulos vermelhos, dos leucócitos multinucleares e das plaquetas.a densidade dos glóbulos vermelhos e dos granulócitos é relativamente grande (cerca de 1,092g/ml) e a densidade das plaquetas situa-se entre 1,030 e 1,035g/ml. Por conseguinte, o meio de separação de linfócitos humanos é utilizado para gerar um certo grau de gradiente de densidade e o sangue total diluído é suavemente pavimentado no meio de separação. Após a centrifugação, os glóbulos vermelhos e os granulócitos afundam-se no fundo do tubo devido à sua grande densidade; uma vez que as suas densidades são inferiores ou iguais à densidade do meio de separação, os linfócitos e os monócitos encontram-se à superfície do meio de separação. Pode também haver uma pequena quantidade de células suspensas no meio de separação. As células mononucleares podem ser separadas do sangue periférico através da sucção das células que se encontram à superfície do meio de separação. Esta série de produtos tem uma série de vantagens, como a utilização rápida e simples, a ausência de citotoxicidade, o elevado rendimento celular e a boa vitalidade. Resolução de problemas A temperatura óptima de separação é (20±5)℃, para além da qual o efeito de separação será afetado. Pré-aqueça o meio de separação à temperatura ambiente (20 ± 5 ℃) e agite suavemente antes de usar. Evitar utilizar o meio de separação diretamente do frigorífico. Para o meio de separação, o meio isotónico (PBS ou NaCl a 0,9%) utilizado para diluir o sangue anticoagulado deve ser estéril e pode ser substituído pelo meio RPMI-1640. a diluição de sangue 1:1 pode reduzir a coagulação dos eritrócitos e aumentar a quantidade de linfócitos colhidos.