O Mouse Lymphocyte Separation Medium é uma nova geração de meio de separação por gradiente de densidade desenvolvido pela Shenzhen Dakewe Bio-engineering Co. O componente principal é o iodixanol, com um peso molecular de 1.550. É um iodeto completamente inerte do ponto de vista químico, não biotóxico, que não se liga a qualquer proteína de função biológica conhecida, não interfere com qualquer proteína da membrana da superfície celular, não inibe a atividade enzimática e não interfere com as respostas antigénio-anticorpo. Os linfócitos separados por este produto são de elevada pureza, bom estado e elevado rendimento. O funcionamento do meio de separação de linfócitos de ratinho é simples, fácil de aprender e não necessita de muita experiência.
O nosso estudo mostrou que o número e a qualidade dos linfócitos do baço do rato não se alteraram significativamente após 1 hora de exposição ao meio de separação, e os resultados subsequentes do teste ELISPOT foram completamente consistentes com os do grupo de controlo.
Princípio do procedimento
A densidade das células mononucleares (linfócitos e monócitos) no sangue periférico situa-se entre 1,075-1,090g/ml, o que é diferente da densidade dos glóbulos vermelhos, dos leucócitos multinucleares e das plaquetas.a densidade dos glóbulos vermelhos e dos granulócitos é relativamente grande (cerca de 1,092g/ml) e a densidade das plaquetas situa-se entre 1,030 e 1,035g/ml. Por conseguinte, o meio de separação de linfócitos humanos é utilizado para gerar um certo grau de gradiente de densidade e o sangue total diluído é suavemente pavimentado no meio de separação. Após a centrifugação, os glóbulos vermelhos e os granulócitos afundam-se no fundo do tubo devido à sua grande densidade;
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