O Swab/Saliva Viral RNA/DNA Extraction Kit é adequado para a extracção rápida de ácidos nucleicos virais de elevada pureza a partir de plasma, soro, zaragatoa nasofaríngea, expectoração, líquido de lavagem broncoalveolar, ascite, sobrenadante de culturas celulares e urina. Este kit baseia-se no método de purificação em coluna de gel de sílica. A amostra é homogeneizada no tampão de lise e os ácidos nucleicos são libertados para o tampão. O tampão de lise contém uma elevada concentração de guanidina. Nestas condições, a membrana absorve os ácidos nucleicos por ligações de hidrogénio e interacções electrostáticas, enquanto as proteínas e outras impurezas não são absorvidas. O lisado é transferido para a coluna de adsorção para filtração e a membrana filtrante contendo ácidos nucleicos é lavada para remover proteínas residuais e outras impurezas e, finalmente, os ácidos nucleicos são eluídos pela solução tampão com baixo teor de sal. Os ácidos nucleicos obtidos podem ser directamente utilizados em experiências a jusante, como transcrição reversa, PCR, RT-PCR, PCR quantitativa de fluorescência, sequenciação de nova geração e Northern blotting.
Componentes principais
O kit é constituído pelos seguintes componentes:
50 mL de Tampão de Lise Proporciona um ambiente para a lise e ligação à coluna
24 mL de tampão de lavagem Remove proteínas residuais e outras impurezas
6 ml de tampão de eluição Solução sem nuclease
100 unidades de Spin Columns Adsorve ácidos nucleicos virais
100 unidades de tubos de recolha Utilizados para a recolha de ácidos nucleicos eluídos
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