Reagente tampão fosfato PE LB™

com enzimasproteasede cromatografia

Bacterial PE LB™ foi desenvolvido para a extração de proteínas solúveis e corpos de inclusão de células bacterianas. Trata-se de uma melhoria patenteada da lise à base de lisozima, que permite a extração de proteínas solúveis e a remoção simultânea de ácidos nucleicos (ADN e ARN) libertados durante a lise celular. A lise bacteriana PE LB™ elimina a acumulação de viscosidade, permitindo uma clarificação eficaz com menor força centrífuga. Este kit é fornecido com um protocolo opcional para a formação de esferoplastos e remoção da enzima lítica (lisozima) antes da lise e extração das proteínas bacterianas. O Bacterial PE LB™ baseia-se em agentes tampão orgânicos e utiliza um detergente não-iónico suave e uma combinação patenteada de vários sais e agentes para melhorar a extração e a estabilidade das proteínas. Dependendo da aplicação, podem ser adicionados ao Bacterial PE LB™ agentes adicionais, tais como agentes redutores, agentes quelantes e cocktail de inibidores de proteases. Este reagente foi testado para utilização com várias bactérias amplamente utilizadas, incluindo estirpes de E. coli. O Bacterial PE LB™ é compatível com a maioria das aplicações a jusante, incluindo a execução de várias cromatografias, aplicações de eletroforese em gel e procedimentos de dobragem de proteínas. O Bacterial PE LB™ também é compatível com a estimativa de proteínas com o ensaio de proteínas NI™ (Non-Interfering Protein Assay)™. Para a lise bacteriana, os kits são adequados para extrair proteínas solúveis de aproximadamente 30 g de pellets de células húmidas por cada 100 ml de PE bacteriano LB™. Quando os kits são utilizados para extrair proteínas solúveis de esferoplastos, são adequados para aproximadamente 9 g de pellets de células húmidas por cada 25 ml de tampão de suspensão bacteriana fornecido.