Reagente de resina 786-285

para pesquisade proteínasde densidade

A cromatografia de afinidade de iões metálicos imobilizados (IMAC), desenvolvida por Porath et al (1), baseia-se na interação de certos resíduos de proteínas (histidinas, cisteínas e, em certa medida, triptofanos) com catiões de metais de transição. A Resina Quelante de Cobre foi especificamente concebida para a purificação de proteínas que se associam a iões de cobre (2-3), incluindo proteínas marcadas com histidina 6x. Resina de cromatografia de afinidade de metais imobilizada (IMAC) que utiliza cobre (Cu2+) para a purificação de proteínas marcadas com 6x histidina. Esta resina liga-se a seis resíduos de histidina (6x His), uma etiqueta comum utilizada na purificação de proteínas. A resina é constituída por iminodiacetato acoplado a esferas de agarose reticuladas a 6%. O iminodiacetato liga iões de cobre divalentes com uma capacidade de 20-40μmoles Cu2+/ml de resina. A capacidade de ligação de proteínas é >50mg de proteína por ml de resina. Demonstrámos a ligação de >100mg de proteínas marcadas com 50kDa 6XHis a um ml de resina. Também estão disponíveis resinas quelantes de níquel, cobalto e zinco imobilizadas. O cobalto tem a maior seletividade, seguido do zinco, do níquel e do cobre, mas tem a menor capacidade de carga. O cobre tem a capacidade de carga mais elevada, seguido do níquel e do zinco. Estão disponíveis tampões específicos de ligação/lavagem e eluição. Características Para a purificação de proteínas de ligação ao cobre, incluindo proteínas 6x His Elevada capacidade: >50mg/ml Densidade do ligando: 20-40μmoles Cu2+ /ml de resina Estrutura do grânulo: agarose reticulada a 6% Aplicações Purificação por afinidade de proteínas de ligação ao cobre Purificação por afinidade de proteínas com uma etiqueta His 6x.