Protocols.io fornece uma versão interactiva deste protocolo, onde pode descobrir e partilhar optimizações com a comunidade de investigação.
Os ensaios de proteínas são utilizados por rotina em muitos campos de investigação para estimar proteínas numa vasta gama de tampões e condições. Um grande problema para os investigadores é selecionar um ensaio de proteínas de entre a vasta seleção existente no mercado que seja compatível com a sua amostra de proteínas. O CB-X™ Protein Assay elimina este problema, uma vez que foi concebido para ser compatível com todos os tampões e condições habitualmente utilizados no isolamento, armazenamento e ensaios de proteínas.
Para amostras de proteínas em tampões aquosos simples e descomplicados, o CB-X™ é um ensaio de reagente único altamente sensível que pode ser efectuado em 5 minutos. O CB-X™ Protein Assay utiliza um corante proteico que é uma melhoria do reagente corante Bradford Coomassie (Figura 1)
Para amostras de proteínas complicadas, o CB-X™ Protein Assay é fornecido com reagentes para limpar as amostras e remover todos os reagentes e produtos químicos que interferem com a estimativa exacta de proteínas (figura 1). Estes reagentes incluem detergentes, agentes chaotrópicos, agentes redutores, agentes alquilantes, açúcares, concentrações elevadas de sal, agentes tampão e agentes quelantes (Tabela 1). A fase de limpeza e o ensaio proteico subsequente são efectuados num único tubo para garantir que não há perda de proteínas e para manter a precisão do ensaio. A Figura 2 demonstra o efeito do CB-X™ na presença de 1% de Triton® X-100 ou 1% de SDS.
Se a amostra de proteína não contiver agentes interferentes, é efectuado um ensaio simples com um único reagente para obter uma resposta linear.
---