Solução tampão FOCUS™

para eletroforesede proteínasde ureia

Uma das considerações mais importantes antes de executar a electroforese em gel 2D é a escolha de amortecedores de solubilização de proteínas. Um tampão adequado deve solubilizar as proteínas eficazmente, sem perturbar a carga nativa das proteínas. A ureia, um chaotropo comum, é amplamente utilizada para a solubilização e desnaturação de proteínas. Uma das desvantagens da utilização da ureia é a carbamilação. Na água, a ureia existe em equilíbrio com o cianato de amónio, cujo nível aumenta com o aumento da temperatura e do pH. O cianato reage com α-amino e ε-amino grupos de proteínas e induz uma mudança no ponto isoeléctrico das proteínas. Isto leva a resultados artefactos. Por conseguinte, a carbamilação deve ser evitada Uma forma de minimizar o risco de carbamilação é preparar os reagentes à base de ureia frescos antes de cada utilização. A G-Biosciences desenvolveu uma série de buffers de solubilização secos, à base de ureia, pré-misturados e prontos a usar. Basta adicionar um volume adequado do tampão de reidratação fornecido ao tampão seco. Depois utilizar para solubilizar proteínas, poupando tempo e melhorando a qualidade da electroforese em gel IEF/2D (Patent Pending). FOCUS™ Os tampões de extracção são também concebidos para serem utilizados como tampões de reidratação para tiras de IPG FOCUS™ Os tampões de extracção são concentrações experimentalmente optimizadas de agentes críticos, tampões e estabilizadores, incluindo ureia, tioureia, Nonidet® P-40, CHAPS e sulfobetaines. Os tampões de extracção FOCUS™ são concebidos para produzir uma óptima extracção de proteínas e uma melhor resolução de pontos para análise de gel 2D.