A tintura da carga do gel 6×, SDS+ é um amortecedor de carregamento pre-misturado com as duas tinturas de seguimento para o agarose e a não-desnaturalização da eletroforese do gel de polyacrylamide. Esta solução contém o SDS, que conduz frequentemente a umas faixas mais afiadas, porque algumas enzimas da limitação limitadas ao ADN lysed pelo SDS. O EDTA é incluído ao magnésio do quelato (até 10 milímetros) nas reações enzimáticos, parando desse modo a reação. O azul do bromofenol e o cyanol do xileno são a tintura de seguimento padrão para a eletroforese
Índices
0,03% cyanol FF do xileno, 0,03% azuis do bromofenol, 1% SDS, glicerol de 60%, o EDTA de 100mM (pH 7,6, ajustado com Tris).
Aplicação
Análise de amostras do ADN com quantidades altas de proteínas obrigatórias do ADN. Experiências cinéticas. Análise do gel do agarose do ADN após digestões da limitação do ADN, ligadura ou reações da desfosforilação.
Características
1% SDS elimina interações da ADN-proteína, impede a aparência das faixas adicionais devido a. recozimento de moléculas do ADN com extremidades coesivas.
o EDTA de 100 milímetros inibe nucleases metal-dependentes.
Indicação do controle de qualidade
A tintura de carregamento do gel, SDS+ (6×) é analisada para a ausência de endonuclease, de exonuclease e de nenhuma atividade do RNase.
Recomendações do uso
1. Adicione 1 volume da tintura da carga do gel 6×, SDS+ a 5 volumes de amostra do ADN.
2.Mix bem, rotação para baixo e carga.