O inibidor de RNase (murino) é um inibidor de RNase de origem murina recombinante expresso na forma solúvel emE. coli.Pode inibir uma ampla gama de RNases (RNase A, B, C).Foi testado por RT-PCR, RT-qPCR e é compatível com várias transcriptases reversas e DNA polimerases.Em comparação com os inibidores de RNase de origem humana, os inibidores de RNase de origem murina não contêm duas das cisteínas muito sensíveis à oxidação de proteínas humanas, portanto, eles têm maior atividade antioxidante e são mais adequados para experimentos com alta sensibilidade DTT, como qPCR.
vocênitDfinalização
A quantidade de enzima necessária para inibir 50% da atividade de 5 ng da RNase A foi definida como 1 unidade de atividade (U).A atividade da RNase A é obtida quantitativamente pela hidrólise de 2',3'-CMP para gerar 3'-CMP.
QualidadeCcontrolar
Detecção de resíduo de exonuclease: 200 U deste produto e 0,6 μg de λ-Hind III foram incubados a 37°C por 16 h, e as bandas de DNA não se alteraram após a eletroforese.
Detecção de resíduo de endonuclease: 200 U deste produto e 0,6 μg de DNA Supercoiled pBR322 foram incubados a 37°C por 4 h, e as bandas de DNA não mudaram após a eletroforese.
E.coliDetecção de resíduos de DNA: o resíduo de ácido nucleico em 200 U deste produto foi detectado porE.coligDNA-specific TaqMan qPCR, e o resíduo deE.coligenoma era inferior a 10 cópias.
Aplicativo
1. Síntese da primeira fita de cDNA
2. Isolamento de polissomas
3.Em vitrotranscrição
4. Nenhum sistema de tradução celularem vitro
AssuntosNeedingAatenção
1. A atividade da RNase foi inibida por uma ampla faixa de valores de pH, com a atividade máxima em pH 7 ~ 8.