O Dongsheng M-MLV Reverse Transcriptase (RT) é um M-MLV RT geneticamente modificado.Difere do M-MLV RT por sua estrutura e propriedades catalíticas.A enzima possui uma atividade de polimerase dependente de RNA e dependente de DNA e uma atividade de ribonuclease H específica para RNA em híbridos de RNA-DNA.A transcriptase reversa Dongsheng M-MLV tem atividade de RNase H significativamente menor do que a transcriptase reversa do vírus da mieloblastose aviária (AMV).
Fonte
Células de E.coli com um fragmento clonado do gene pol que codifica a transcriptase reversa do vírus da leucemia murina de Moloney.
Formulários
Geração de cDNA de primeira fita para uso em:
-PCR, veja Protocolo para Síntese de cDNA de Primeira Cadeia;
-PCR em tempo real;
-síntese de cDNA da segunda fita;
marcação de DNA;
Análise de RNA por extensão de primer.
Controle de qualidade
Ausência de endodesoxirribonucleases, exodesoxirribonucleases, fosfatases e ribonucleases confirmada por testes de qualidade apropriados.
Testado funcionalmente na síntese da primeira fita de cDNA.
Armazenar buffer
20m M Tris-HCl (pH 7,5)
NaCl 200 mM
EDTA 0,1 mM
1mM DTT
0,01% NP-40
50% glicerol
5x Buffer de Primeira Cadeia
Tris-HCl 250 mM (pH 8,3 a 25°C)
375 mM KCl
15 mM MgCl2
50 mM DTT