Kit de reagentes em solução G01132-96

para microbiologiade diagnósticopara RT-qPCR

O virellaSARS-CoV-2 mutant real time RT-PCR Kit é um ensaio para a diferenciação simultânea das novas linhagens de coronavírus (SARS-CoV-2) B.1.1.7 (Reino Unido, UK), B.1.351 (África do Sul, ZA) e P.1 (Brasília, BRA) a partir de amostras biológicas. 2 Princípio do teste O kit virellaSARS-CoV-2 mutant real time RT-PCR Kit contém quatro sistemas de primers e sondas específicos para a deteção de mutações da proteína spike do SARS-CoV-2. Cada mutação está relacionada com um corante específico. Se uma das mutações estiver presente, o canal específico não apresentará qualquer sinal ou apresentará um sinal retardado. As mutações abrangidas por este ensaio são del69/70 (FAM), del 241-243 (ROX), N501Y (HEX) e H655Y (Cy5). No caso das mutações B.1.1.7 (UK), B.1.351 (ZA) ou P.1 (BRA), o canal HEX e um canal adicional, consoante a mutação, não apresentam qualquer sinal ou apresentam um sinal retardado (Quadro 7). Neste caso, os outros dois canais devem apresentar um sinal normal. 4 Equipamento e reagentes a fornecer pelo utilizador - Microtubos esterilizados - Pipetas (volume ajustável) - Pontas de pipeta esterilizadas com filtro - Centrifugadora de mesa - Vortexer - Instrumento de PCR em tempo real - Tubos de reação de PCR ópticos com tampa ou placa de reação de PCR ótica com folha ótica - Opcional: Sistema de manuseamento de líquidos para automatização 7 Material de amostra O material de partida para o kit virellaSARS-CoV-2 mutant real time RT-PCR é o ARN qualificado como SARS-CoV-2 positivo por RT-PCR em tempo real. Os eluatos com números de cópias muito baixos, que resultam em valores de CT >32, não são adequados para testes com o virellaSARS-CoV-2 mutant real time RT-PCR. 8 Preparação da amostra O ARN eluído tem de ser diluído 1:10 em Dilution Buffer (tampão de diluição) para otimizar as condições de deteção da mutação.