Os kits NukEx Mag Extreme SC e NukEx Mag Extreme SL foram concebidos para a extração manual e automatizada rápida de ácidos nucleicos de uma vasta gama de amostras difíceis (por exemplo, amostras humanas, amostras veterinárias, insectos, amostras de alimentos, etc.). Os kits foram concebidos para serem utilizados com homogeneizadores de tecidos para a rutura mecânica de amostras e subsequente purificação de ácidos nucleicos utilizando esferas magnéticas. Os ácidos nucleicos purificados podem ser utilizados diretamente como modelo para PCR em tempo real (transcrição inversa) ou para qualquer tipo de reacções enzimáticas. Os kits NukEx Mag Extreme permitem uma fácil automatização em instrumentos comuns de manuseamento de líquidos ou separadores magnéticos automatizados.
2 Modo de ação
a) As amostras são lisadas por rutura mecânica na presença do Tampão de Extração 1 (EX1) e subsequente adição do Tampão de Extração 2 (EX2).
b) Os ácidos nucleicos são ligados às esferas magnéticas NukEx (MB).
c) Os ácidos nucleicos ligados são lavados com Tampão de Remoção de Inibidores (P2) para remover os inibidores de PCR da amostra.
d) Os ácidos nucleicos ligados são lavados com o tampão de lavagem (P3) para os purificar de sais, proteínas e outras impurezas celulares.
e) Os ácidos nucleicos purificados são eluídos das esferas magnéticas NukEx com o tampão de eluição (P4).
4 Equipamento e reagentes a fornecer pelo utilizador
Nota: os consumíveis não incluídos no kit dependem do modo de preparação da amostra, por exemplo, extração manual ou extração utilizando processadores de partículas magnéticas como o KingFisher Flex.
homogeneizador (Fast Prep, Precellys, TissueLyser ou equivalente)
tubo de microcentrifugação de 1,5 ou 2,0 ml sem nuclease
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