A L-Tiroxina (T4) é uma hormona que é sintetizada e armazenada na glândula tiroide. A clivagem proteolítica da tiroglobulina folicular liberta T4 na corrente sanguínea. Mais de 99% da T4 liga-se reversivelmente a três proteínas plasmáticas no sangue - a globulina de ligação à tiroxina (TBG) liga-se a 70%, a pré-albumina de ligação à tiroxina (TBPA) liga-se a 20% e a albumina liga-se a 10%. Aproximadamente 0,03% da T4 encontra-se no estado livre e não ligado no sangue em qualquer altura. As doenças que afectam a função tiroideia podem apresentar uma grande variedade de sintomas confusos. A medição do T4 total por imunoensaio é o teste de rastreio mais fiável e conveniente disponível para determinar a presença de perturbações da tiroide nos doentes. Foram encontrados níveis aumentados de T4 no hipertiroidismo devido à doença de Grave e à doença de Plummer e na tiroidite aguda e subaguda. Níveis baixos de T4 têm sido associados a hipotiroidismo congénito, mixedema, tiroidite crónica (doença de Hashimoto) e a algumas anomalias genéticas.
PRINCÍPIO DO TESTE
No teste T4 EIA, uma determinada quantidade de anticorpo anti-T4 é revestida em poços de microtitulação. Uma quantidade medida de soro do doente e uma quantidade constante de T4 conjugada com peroxidase de rábano são adicionadas aos poços de microtitulação. Durante a incubação, o T4 e o T4 conjugado competem pelos sítios de ligação limitados do anticorpo anti-T4. Após 60 minutos de incubação à temperatura ambiente, os poços são lavados 5 vezes com água para remover o conjugado T4 não ligado. Adiciona-se então uma solução de Reagente TMB e incuba-se durante 20 minutos, resultando no desenvolvimento de cor azul.
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