Prepara o caminho para a análise funcional de uma questão de investigação específica.
Utilização prevista
Este kit FluoroSpot Path destina-se à contagem de células que segregam IFN-γ e IL-2 humanos em resposta a péptidos de CMV utilizando o ensaio FluoroSpot. Apenas para utilização em investigação. Não se destina a ser utilizado em procedimentos de diagnóstico.
Composição do pool de péptidos
O pool de péptidos do CMV contém 42 péptidos derivados do CMV. Os antigénios representados no pool de péptidos são pp50, pp65, IE1, IE2 e glicoproteína do envelope B. Dos péptidos incluídos, 28 são restritos ao MHC de classe I e 14 são restritos ao MHC de classe II.
Desempenho
As PBMC humanas (250 000 células/poço) foram incubadas durante a noite na ausência ou na presença do pool de péptidos do CMV para células T CD4 e CD8 humanas (Mabtech) e o número de células que segregam IFN-γ e/ou IL-2 foi analisado por FluoroSpot. Foram determinadas as células que segregam uma única citocina, bem como as células com dupla secreção. O Spot Center foi utilizado para identificar manchas de células com secreção dupla, visualizadas numa sobreposição de imagens de LED490, FITC (IFN-γ) e LED550,Cy3 (IL-2). A análise dos pontos foi efectuada com o Mabtech IRIS.
IFN-γ
Descrição do analito
O interferão-γ (IFN-γ) é o único interferão de tipo II. Esta citocina pró-inflamatória é segregada por células T activadas e células NK. Ativa os macrófagos e as células endoteliais e regula as respostas imunitárias afectando as APC, as células T e as células B. A produção de IFN-γ por células T auxiliares e células T citotóxicas é uma caraterística do fenótipo do tipo Th1. Assim, a produção de alto nível de IFN-γ está normalmente associada a uma defesa eficaz do hospedeiro contra agentes patogénicos intracelulares.
Nomes alternativos - Interferão-γ, Interferão-gama, IFN-γ, IFN-gama, IFN-g, IFNg, IFG, IFI, IMD69
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