Este kit FluoroSpot pode ser configurado de várias formas - concebido para a caraterização de células B.
Utilização prevista
Este kit FluoroSpot Flex destina-se à contagem de células B que segregam IgM e IgA de ratinho utilizando o ensaio FluoroSpot. As células B que segregam anticorpos específicos de antigénios, bem como as células B que segregam anticorpos independentemente da especificidade do antigénio, podem ser medidas com este kit. Apenas para utilização em investigação. Não se destina a ser utilizado em procedimentos de diagnóstico.
Para a análise de células B de memória, pode ser necessário pré-ativar as células com R848 e IL-2 de ratinho recombinante (ambos incluídos).
Desempenho
Imagens de IgM e IgA de ratinho da análise de esplenócitos activados in vivo de ratinhos BALB/c hiperimunizados (com ovalbumina) em FluoroSpot IgM/IgG/IgA. foram incubadas 75.000 células/poço na placa FluoroSpot durante 5 horas sem estimulação.
Descrição do analito
A imunoglobulina M (IgM) é o primeiro isótipo de anticorpo (também designado por classe) segregado pelo sistema imunitário adaptativo em resposta a um antigénio estranho. As células B do plasma segregam IgM principalmente como pentâmeros, ou seja, cinco moléculas de IgM unidas pela cadeia J. Uma vez que a IgM é formada no início da resposta imunitária e é posteriormente substituída por IgG, os anticorpos específicos da classe IgM são característicos de uma infeção recente, em curso ou crónica. Por conseguinte, a IgM representa o isótipo com a menor afinidade para os antigénios. Devido à sua estrutura, com 10 locais de ligação a antigénios por pentâmero de IgM, pode, no entanto, ligar-se a antigénios ligados à superfície com uma avidez muito elevada. A imunoglobulina M constitui aproximadamente 10% da concentração total de imunoglobulinas no soro.
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