Solução de preparação de bibliotecas MPS baseada em complemento inverso (RC-PCR) para a análise de regiões hipervariáveis (hotspots de mutação) em quantidades muito reduzidas de mtDNA nuclear (altamente degradado) em amostras complexas que não fornecem um STR completo. Para laboratórios nos países em que a sequenciação completa do genoma no domínio forense é restringida por directrizes ou regulamentos.
A RC-PCR permite a amplificação multiplex orientada, a indexação da sequenciação e a adição de adaptadores que ocorrem simultaneamente numa única reação em tubo fechado.
Compatibilidade
Todos os amplicons foram concebidos para cumprir os comprimentos de fragmento mais curtos possíveis e são compatíveis com os sistemas illumina® MiSeq™, com leituras 2x 10 bp Unique Dual Index.
Os kits IDseek® foram testados com ácido tânico e ácido húmico. A tecnologia RC-PCR permite a análise fiável de amostras altamente degradadas frequentemente encontradas em casos forenses.
Bibliotecas prontas para seqüências
IDseek® compreende uma solução completa de reagentes e consumíveis necessários para a geração de bibliotecas MPS prontas para sequência para aplicações forenses: da indexação à amplificação, limpeza da biblioteca magnética e seleção de tamanho.
Componentes do IDseek
Reagentes e consumíveis IDseek® necessários para 96 reações:
- RC-PCR Probe Mix
- RC-PCR HiFi 2x Hotstart PCR Mastermix
- 2x Placas de primers de índice único pré-manchadas desidratadas
- AmpliClean™ Cleanup, esferas magnéticas
Recomenda-se a utilização de um íman compatível com tubos de centrifugação de 1,5 ml/2,0 ml para utilização com o AmpliClean™ Magnetic Bead Cleanup.
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