O NZYTech SARS-CoV-2 One-Step RT-qPCR Kit III, 5 Targets, IVD, fornece o conjunto completo de reagentes e sondas para detetar qualitativamente o genoma do SARS-CoV-2, através de plataformas comuns de PCR em tempo real. Os genes da polimerase do ARN dependente do vírus (RdRp) e da fosfoproteína do nucleocápsido (N) foram previamente identificados como marcadores altamente específicos do SARS-CoV-2. Além disso, este kit detecta uma terceira região localizada no gene estrutural do envelope E, comum a todos os Sarbecovírus e que também está presente no SARS-CoV-2. Este kit NZYTech visa regiões específicas nos genes RdRp, N e E do genoma do SARS-CoV-2 para proporcionar a mais elevada sensibilidade de deteção.
A RT-qPCR de uma etapa continua a ser o método mais fiável e sensível para efetuar uma deteção precisa do ARN do SARS-CoV-2, que é indicativo de uma infeção humana. O ARN viral isolado e purificado a partir de amostras infectadas é retrotranscrito para cDNA e subsequentemente amplificado numa única reação utilizando dois conjuntos de primers/sondas altamente específicos que exploram o chamado princípio TaqMan®. Durante este processo, as sondas ligam-se especificamente a cinco regiões do genoma do SARS-CoV-2. Um conjunto adicional de primers/sondas actua como controlo interno endógeno para detetar ácidos nucleicos do gene RP humano, avaliando a qualidade da amostra. Para permitir a identificação da amplificação dos seis alvos específicos numa única reação, os genes SARS-CoV-2 RdRp, N & E e as sondas específicas RP humanas estão marcados de forma diferente, com os corantes repórter HEX™, FAM™, Texas Red ® e Cy5™, respetivamente. Note-se que este painel contém um ensaio hexaplex em quatro canais ópticos distintos que permitem compensar mutações e variantes emergentes do SARS-CoV-2, garantindo a confiança nos seus resultados.
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