Kit de reagentes em solução NZYGigaprep

solução tampãopara transcrição in vitrode Escherichia coli

O kit NZYGigaprep permite a preparação rápida de ADN plasmídico altamente puro em grande escala a partir de estirpes de E. coli. Detalhes O kit NZYGigaprep foi concebido para a preparação rápida e em grande escala de ADN plasmídico de elevada pureza. O kit foi optimizado para obter tipicamente 2-10 miligramas de ADN de plasmídeos com elevado número de cópias ou 500 microgramas a 2 miligramas de ácido nucleico de plasmídeos com baixo número de cópias, todos provenientes de estirpes recombinantes de Escherichia coli. O nosso kit simplifica o processo com um procedimento de lise alcalina/SDS modificado. Este procedimento prepara o pellet de células bacterianas para a purificação de plasmídeos. Envolve a desnaturação do ADN cromossómico e do plasmídeo em condições alcalinas. Em seguida, a introdução de acetato de potássio inicia a formação de um precipitado que contém ADN cromossómico e outros componentes celulares. Simultaneamente, o tampão de acetato de potássio neutraliza o lisado, permitindo que o ADN plasmídico regresse ao seu estado nativo de superenrolamento, mantendo-o em solução. Depois de equilibrar a coluna com o tampão de equilíbrio, o ADN plasmídico liga-se seletivamente à resina de permuta aniónica. Com uma lavagem completa da coluna, o ADN plasmídico é eficientemente purificado e está pronto para eluição. Um simples passo de precipitação permite-lhe recolher o ADN eluído, que pode então ser prontamente dissolvido em tampão TE para utilização subsequente. O ADN purificado é adequado para as aplicações de biologia molecular mais exigentes, incluindo transfecção, transcrição in vitro, sequenciação automática fluorescente ou manual, clonagem, PCR e hibridação. Para isolar ADN de plasmídeos, BACs ou cosmídeos com baixo número de cópias, duplicar os volumes dos tampões M1, M2 e M3