Isolar ADN plasmídico com baixo teor de endotoxinas (<1EU/µg) de culturas bacterianas até 200 ml utilizando colunas spin maxi
Visão geral
O E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Maxi Kit fornece um método eficiente para o isolamento em larga escala de ADN plasmídico com baixo teor de endotoxinas. O sistema utiliza seringas de filtro de limpeza de lisado em vez de centrifugação para limpar rapidamente lisados bacterianos após lise alcalina. Após a depuração do lisado, as endotoxinas são removidas e o protocolo segue um procedimento simples de "lavagem e eluição" para obter ADN plasmídico de alta qualidade. Os rendimentos variam de acordo com o número de cópias do plasmídeo, a estirpe de E. coli e as condições de crescimento. 50-200 mL de culturas bacterianas em meio LB produzem normalmente 0,6-1,2 mg de ADN plasmídico com elevado número de cópias. Podem ser processados até 500 ml de cultura quando se trabalha com plasmídeos de baixo número de cópias. O sistema utiliza a tecnologia de centrifugação ou de vácuo para a purificação de plasmídeos e elimina as demoradas colunas de fluxo por gravidade que requerem a precipitação de álcool. O ADN plasmídico purificado é adequado para aplicações sensíveis a jusante, tais como transfecção de células de mamíferos, clonagem, sequenciação automática de ADN fluorescente (as leituras típicas excedem 800 pb), sequenciação de nova geração, digestão por enzimas de restrição, ligação, PCR, transcrição in vitro, transformação, etc.
Rápido - Purificação de ADN plasmídico em menos de 45 minutos
Seguro - Sem extracções de fenol/clorofórmio
Versátil - Disponível nos formatos de centrifugação e vácuo
Alta qualidade - ADN plasmídico de grau de transfecção, com baixo teor de endotoxinas (< 1 UE/µg)
Especificações
Não se destina a ser utilizado em procedimentos de diagnóstico.
CARACTERÍSTICAS - ESPECIFICAÇÕES
Aplicação a jusante - Transfecção, terapia génica, clonagem, transcrição in vitro, nova geração
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