Kit de reagentes em solução E.Z.N.A.®

para PCRpara ácidos nucleicosde bactérias

Isolar ADN plasmídico com baixo teor de endotoxinas (<1EU/µg) de culturas bacterianas até 5 ml utilizando mini-colunas de centrifugação Visão geral O plasmídeo isolado com procedimentos de purificação tradicionais contém normalmente níveis elevados de endotoxinas (também conhecidas como lipopolissacáridos ou LPS) que podem interferir significativamente com as experiências de transfecção a jusante. Podem ser utilizados até 5 ml de culturas nocturnas para plasmídeos com elevado número de cópias e 10 ml para baixo número de cópias. O E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Mini Kit I integra uma etapa eficiente de remoção de endotoxinas no procedimento de purificação do plasmídeo para produzir plasmídeo de grau de transfecção de alta qualidade (<0,1 EU/µg) para uma transfecção eficiente. As células bacterianas são lisadas utilizando o método de lise alcalino-SDS. O lisado celular limpo é então tratado com o reagente ETR para remover eficazmente as endotoxinas. Após o ajuste das condições de ligação, o lisado celular é aplicado na coluna de ADN HiBind® e o ADN purificado é eluído a partir da membrana da coluna. Rápido - 30 minutos ou menos Seguro - Sem extracções de fenol/clorofórmio Versátil - Disponível nos formatos de centrifugação e vácuo Alta qualidade - Endotoxinas reduzidas de forma eficiente (<0,1 EU/µg) Especificações CARACTERÍSTICAS - ESPECIFICAÇÕES Aplicação a jusante - Transfecção de linhas celulares sensíveis; terapia genética, etc. Material de partida - 1-5 mL de cultura LB com OD600 entre 2 e 3; ou equivalente Tipo de plasmídeo - ADN de alta cópia, baixa cópia e cosmídeo Modo de processamento - Manual, centrifugação Rendimento - 1 - 24 Tecnologia de ligação do ADN - Mini coluna de spin de sílica Método de limpeza do lisado - Centrifugação Tempo de processamento - <30 minutos Rendimento - 15-25 µg para elevado número de cópias; 0,1-5 µg para baixo número de cópias Outros - Inclui a etapa de remoção de endotoxinas