Kit de teste para pesquisa médica CellTiter-Fluor™

de viabilidade celularde citotoxicidadede protease

Multiplex com muitos outros ensaios luminescentes A normalização de dados para números de células vivas torna os resultados mais comparáveis com outros dados Como funciona o ensaio O Ensaio de Viabilidade Celular CellTiter-Fluor™ é um ensaio de fluorescência não-lítico, de adição de reagente único, que mede o número relativo de células viáveis numa população. O ensaio baseia-se na medição de uma atividade de protease conservada e constitutiva em células vivas e, por conseguinte, funciona como um biomarcador da viabilidade celular. A atividade da protease em células vivas é restrita a células viáveis intactas e é medida utilizando um substrato peptídico fluorogénico permeável às células (Gly-Phe-AFC). O substrato entra nas células intactas, onde é clivado pela atividade da protease de células vivas para gerar um sinal fluorescente proporcional ao número de células vivas. A protease de células vivas torna-se inativa após a perda de integridade da membrana e a fuga para o meio de cultura circundante. Multiplexagem com o Ensaio CellTiter-Fluor™ O ensaio CellTiter-Fluor™ também pode ser utilizado num formato multiplex sequencial de poço único com outros produtos químicos de ensaio a jusante para normalizar os dados por número de células. Os dados do ensaio podem servir como controlo interno e permitir a identificação de erros resultantes da aglomeração de células ou da citotoxicidade do composto. No exemplo de dados à direita, a ionomicina e o PMA funcionam em cooperação para estimular a expressão de genes dependentes de NFAT; no entanto, uma concentração mais elevada de ionomicina resulta numa diminuição da expressão. Ao monitorizar simultaneamente a viabilidade com o ensaio CellTiter-Fluor™, demonstra-se que a diminuição da expressão se deve a uma diminuição das células viáveis.