O ensaio rápido envolve um protocolo simples de adição de dois reagentes
O substrato reage diretamente com o H2O2; não é necessária a HRP como enzima de acoplamento
Resumo
O Ensaio ROS-Glo™ H₂O₂ é um ensaio bioluminescente homogéneo, rápido e sensível que mede o nível de peróxido de hidrogénio (H₂O₂), uma espécie reactiva de oxigénio (ROS), diretamente na cultura de células ou em reacções enzimáticas definidas. Um substrato de luciferina derivatizado é incubado com a amostra e reage diretamente com H₂O₂ para gerar um precursor de luciferina. A adição da Solução de Deteção ROS-Glo™ converte o precursor em luciferina e fornece a Luciferase Recombinante Ultra-Glo™ para produzir um sinal luminoso que é proporcional ao nível de H₂O₂ presente na amostra.
O Substrato H₂O₂ reage diretamente com o H₂O₂ para criar o Precursor de Luciferina. A Solução de Deteção de Substrato ROS-Glo™ converte o Precursor de Luciferina em luciferina e também fornece a Luciferase Ultra-Glo™ para produzir luz. O sinal de luz é proporcional à quantidade de H₂O₂ no poço da amostra.
Visão geral do protocolo do ensaio ROS-Glo™ H₂O₂ para a deteção celular ou bioquímica
O ensaio segue um protocolo simples de adição de dois reagentes que não requer a manipulação da amostra. O substrato ROS-Glo™ H₂O₂ pode ser adicionado aos poços do ensaio com o tratamento ou no final do período de incubação do tratamento, e os dados podem ser registados em menos de 2 horas após a adição do reagente.
Efetuar ensaios enzimáticos ou baseados em células em placas de 96 e 384 poços
O tratamento com menadiona das células K562 resultou num aumento de ROS dependente da concentração, conforme detetado com o ensaio ROS-Glo™ H₂O₂.
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