O princípio da PCR digital consiste em dividir o modelo de ácidos nucleicos em câmaras de reação separadas, permitindo a quantificação de moléculas individuais através da amplificação por PCR e da deteção de sinais de fluorescência. Ao contrário da PCR em tempo real, a PCR digital não se baseia em valores Ct ou curvas de calibração padrão. Oferece uma sensibilidade, precisão e repetibilidade excecionalmente elevadas, tornando-a uma tecnologia de análise quantitativa absoluta.
O DropX-2000 Droplet Digital PCR System coloca esta poderosa tecnologia à sua disposição, permitindo uma investigação inovadora a níveis anteriormente inatingíveis. O princípio fundamental da PCR digital é o particionamento e a distribuição de Poisson. Os amplicons de DNA ou RNA são divididos em mais de 20.000 gotículas, sendo que cada gotícula contém 0 ou 1 cópia do amplicon. Após a conclusão do ciclo térmico da PCR, as gotículas que contêm amplicões apresentam fluorescência, enquanto as que não contêm cópias não apresentam. O número de gotículas fluorescentes é então contado como "0" ou "1". Ao utilizar a distribuição de Poisson, a concentração (número de cópias) da amostra pode ser calculada com base no número de gotículas fluorescentes. O Sistema DropX-2000 utiliza tecnologia microfluídica avançada para conseguir a partição da amostra, gerando aproximadamente 20.000 gotículas de tamanho nanolitro por amostra.
O sistema DropX-2000 é adequado para várias aplicações, incluindo a investigação de biomarcadores tumorais, a análise da variação do número de cópias, a deteção de agentes patogénicos virais, a deteção microbiana, a deteção de organismos geneticamente modificados, a deteção de mRNA e miRNA, a deteção de amostras de ácidos nucleicos raros, o controlo de qualidade de padrões de referência NGS e a verificação de resultados de edição de genes.
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