O AAV8 Titration ELISA Test Kit é um imunoensaio enzimático competitivo para a determinação quantitativa de partículas de AAV serotipo 8 em sobrenadantes de culturas celulares e preparações de vírus purificados.
Descrição do produto
O REAGEN AAV8 Titration ELISA Test Kit é um imunoensaio enzimático competitivo para a determinação quantitativa de partículas de AAV serotipo 8 em sobrenadantes de culturas celulares e preparações de vírus purificados.
Os vírus adeno-associados (AAV) são vírus ssDNA não patogénicos, que são objeto de estudos intensos como vectores virais para terapia genética. O vírus transduz uma variedade de células em divisão e não em divisão, mostrando uma expressão genética a longo prazo com baixa resposta imunitária celular. O AAV tem sido utilizado em vários ensaios clínicos (por exemplo, FIX, CFTR, Parkinson, doença de Canavan), não apresentando efeitos adversos graves relacionados com o vetor. Os métodos para a caraterização das preparações de AAV incluem atualmente ELISA de titulação, qPCR, ddPCR, DNA dot blot, determinação de unidades de transdução, ensaio do centro infecioso, SDS-PAGE ou microscopia eletrónica. A imunotitulação por REAGEN' AAV8 Titration ELISA oferece um método rápido, sensível e reprodutível para a titulação de viriões AAV8 de tipo selvagem intactos, viriões AAV8 recombinantes ou cápsides AAV8 vazias montadas e intactas.
Resumo do procedimento
REAGEN O ensaio baseia-se na técnica ELISA em sanduíche. Um anticorpo monoclonal específico para um epítopo conformacional em cápsides de AAV8 montadas é revestido em tiras de uma placa de microtitulação, sendo as partículas de AAV capturadas detectadas em duas etapas:
Foi utilizado outro anticorpo anti-AAV8 como anticorpo de deteção.
Um anticorpo secundário IgG Fc anti-humano reage com o imunocomplexo.
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