Este kit HTRF permite a deteção quantitativa, com base em células, de STING fosforilado em ratos como leitura da ativação da via cGAS-STING.
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Este ensaio baseado em células HTRF quantifica de forma conveniente e precisa a STING fosforilada de ratinho em Ser365. Após a infeção por agentes patogénicos e a ligação do dsDNA ao sensor citoplasmático cGAS, a proteína STING é fosforilada por TBK1. Isto permite a sua ligação ao IRF3, que induz a produção de IFNs tipo 1 e outras respostas imunitárias. A via de STING é então desactivada pela degradação de STING através de autofagia.
Outras especificações
Tamanho da unidade 500 pontos de ensaio
Como funciona
Princípio do ensaio Mouse Phospho-STING (Ser365)
O ensaio Mouse Phospho-STING (Ser365) mede a STING de ratinho quando fosforilada em Ser365. Ao contrário do Western Blot, o ensaio é inteiramente baseado em placas e não requer géis, eletroforese ou transferência. O ensaio Mouse Phospho-STING (Ser365) utiliza 2 anticorpos marcados: um com um fluoróforo dador e outro com um aceitador. O primeiro anticorpo é selecionado pela sua ligação específica ao motivo fosforilado na proteína, o segundo pela sua capacidade de reconhecer a proteína independentemente do seu estado de fosforilação. A fosforilação da proteína permite a formação de um imuno-complexo envolvendo os dois anticorpos marcados. Isto faz com que o fluoróforo dador fique muito próximo do aceitador, gerando assim um sinal FRET. A sua intensidade é diretamente proporcional à concentração de proteína fosforilada presente na amostra e fornece um meio de avaliar o estado de fosforilação da proteína num formato de ensaio sem lavagem.
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