O kit Total H2AX foi concebido para monitorizar o nível de expressão da H2AX humana celular e pode ser utilizado como ensaio de normalização para o kit de deteção Phospho-H2AX (Ser139).
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O kit Total-H2AX permite a deteção quantitativa da variante de histona humana H2AX. A fosforilação específica da H2AX em Ser139 pode ocorrer quando o ADN de cadeia dupla se quebra, quer devido a radiação ionizante quer a processos fisiológicos endógenos. Esta modificação, denominada gama-H2AX (fosfo-Ser139), desencadeia a paragem do ciclo celular e a reparação da resposta aos danos no ADN, o que torna este ensaio particularmente adequado para o estudo da estabilidade do genoma, do ciclo celular, da reparação do ADN e, de um modo mais geral, como biomarcador do cancro e para a investigação do processo de envelhecimento.
Outras especificações
Tamanho da unidade 500 pontos de ensaio
Como funciona
Princípio do ensaio H2AX total
O ensaio Total-H2AX quantifica o nível de expressão de H2AX num lisado celular. Ao contrário do Western Blot, o ensaio é inteiramente baseado em placas e não requer géis, eletroforese ou transferência. O ensaio Total-H2AX utiliza dois anticorpos marcados: um acoplado a um fluoróforo dador e o outro a um aceitador. Ambos os anticorpos são altamente específicos para um epítopo distinto na proteína. Na presença de H2AX num extrato celular, a adição destes conjugados coloca o fluoróforo dador em estreita proximidade com o aceitador, gerando assim um sinal FRET. A sua intensidade é diretamente proporcional à concentração da proteína presente na amostra e proporciona um meio de avaliar a expressão da proteína num formato de ensaio sem lavagem.
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