Este kit HTRF foi concebido para detetar as proteínas do nucleocapsídeo do SARS-CoV-2 em lisados ou sobrenadante de células, como marcador de infeção viral.
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A proteína N do SARS-CoV-2 é o constituinte monomérico basal do nucleocápside oligomérico do coronavírus. Esta proteína é um imunogénio importante, predominantemente expresso nas fases iniciais da infeção viral e presente desde o primeiro dia no soro dos doentes infectados. Como tal, a proteína N do SARS-CoV-2 é um marcador fiável da infeção viral e um possível candidato a imunogénio para o desenvolvimento de uma vacina.
Outras especificações
Tamanho da unidade 500 pontos de ensaio
Como funciona
As partículas de SARS-CoV-2 são detectadas em lisados de células utilizando um imunoensaio em sanduíche que envolve um anticorpo monoclonal anti-nucleocápsido, marcado com terbium-Cryptate ou d2, garantindo a qualidade do ensaio, a reprodutibilidade e a qualidade do sinal. O sinal HTRF específico gerado é proporcional à quantidade de proteínas do nucleocapsídeo.
O protocolo do ensaio, utilizando uma placa de pequeno volume de 384 poços ou uma placa de baixo volume de 96 poços (20 µL final), é descrito à direita. são dispensados 16 µL de lisados de células ou de controlo diretamente na placa de deteção para deteção por reagentes HTRF. Os anticorpos marcados com dador e aceitador HTRF podem ser pré-misturados e adicionados num único passo de dispensa para simplificar ainda mais o procedimento de ensaio (4 µL), ou separadamente (2 µL).
Deteção do nucleocápsido recombinante do SARS-CoV-2
foram dispensados 16 µL de proteína recombinante no tampão de lise #5 numa microplaca branca de baixo volume antes da adição de 4 µL dos reagentes de deteção de capsídeo HTRF anti SARS-CoV-2 pré-misturados. O sinal HTRF foi registado após 2 horas de incubação à temperatura ambiente.
Curva padrão do kit Capsid
Volume final do ensaio - 20 µL
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