A tira-teste rápido de Melatonina é um teste imunocromatográfico, utilizando o método de imunoensaio com ouro coloidal. Baseia-se na competição entre os resíduos de Melatonina na amostra e a Melatonina na linha T, até à quantidade limitada de anticorpos corantes. Como se apresenta uma quantidade suficiente de medicamento na amostra, o medicamento irá saturar o anticorpo. Consequentemente, mostrará uma linha T extremamente leve ou mesmo invisível, indicando um resultado positivo. Por outro lado, se houver uma amostra negativa (ou a quantidade do fármaco for inferior à concentração mínima detectável), irá gerar duas linhas óbvias tanto na secção da linha T como na secção da linha C.
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