Tubo de ensaio para laboratório

para PCR

As aplicações baseadas em fluorescência, como a PCR em tempo real (qPCR), principalmente em caso de utilização de pequenos volumes, se beneficiam das propriedades de reflexão significativamente melhores dos consumíveis de PCR brancos. No entanto, muitas vezes ainda são utilizados consumíveis transparentes para a realização de qPCRs. Descubra aqui como é possível melhorar suas qPCRs de forma muito simples. De que forma a utilização dos recipientes de PCR brancos influenciam na reprodutibilidade? Graças à reflexão de fluorescência máxima dos recipientes brancos, por um lado não se perde a luz de fluorescência através da migração dos poços e, por outro, a quantidade de luz de fluorescência que chega ao detector é mais constante do que com a utilização de produtos transparentes. Sendo assim, é possível obter uma menor dispersão na detecção de duplicados e triplicados, bem como na repetição de experimentos. Como é possível conseguir uma relação sinal/fundo melhor? Devido aos níveis de fluorescência muito superiores dos consumíveis de PCR brancos e aos efeitos de fundo constantes graças ao fluoróforo usado, na detecção em recipientes de PCR brancos se consegue uma relação sinal/ fundo melhor. A contaminação cruzada (”crosstalk”) entre os poços pode ser prevenida? Se forem usados poços transparentes, devido à dispersão da luz de fluorescência, é possível que seja detectada a fluorescência dos poços adjacentes. Devido à coloração completa e opaca dos consumíveis de PCR brancos, os detectores de fluorescência dos termocicladores não conseguem mais detectar sinais de fluorescência dos poços adjacentes.