O dUTP ultrapuro (2'-desoxiuridina, 5'-trifosfato) é fornecido como sal de sódio em água purificada (pH 8,5). O dUTP pode ser utilizado em vez do dTTP em protocolos de PCR e RT-PCR para evitar a transferência de amplificações anteriores. A substituição de dUTP por dTTP na PCR resulta em produtos de PCR contendo uracilo que são adequados para a maioria das aplicações padrão. A enzima uracil-N-glicosilase (UNG, também referida como UDG) pode ser adicionada a uma pré-mistura PCR para extirpar o uracilo de qualquer produto PCR contaminante, evitando assim falsos positivos. Cada lote de dUTP é testado para garantir a amplificação específica do ADN e a ausência de atividade de nuclease.
Características
Ideal para amplificação de PCR e síntese de cDNA
Sem nuclease e ribonuclease
Aplicações
Evitar a contaminação por transferência entre PCRs para eliminar uma fonte de falsos positivos.
Nota de preparação
Solução de trabalho: Recomenda-se a preparação de uma mistura de desoxinucleótidos que contenha dATP, dCTP, dGTP (10 mM, cada), dUTP (20 mM); (por exemplo, para a preparação de 100 μl de mistura de nucleótidos, adicionar 10 μl de dATP, dCTP, dGTP (cada) e 20 μl de dUTP a 50 μl de água, grau PCR).
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