A tecnologia ClonExpress® é uma tecnologia de clonagem simples, rápida e eficiente de ADN sem costura, que pode clonar a inserção em qualquer posição de qualquer vector. Utiliza qualquer método para linearizar o vector, e realizar PCR frente/verso sobre o inserto. O 5'end do primer é introduzido na sequência final do vector linearizado, para que os 5'e 3'end do produto de PCR tenham a mesma sequência (15 bp-20 bp) que os dois endos do vector linearizado. Após o produto PCR da sequência e o vector linearizado serem misturados numa certa proporção, sob a catálise da recombinase, a reacção pode ser realizada a 37°C durante 30 min para completar a clonagem direccional.
Como uma nova geração de kit de clonagem de recombinação, ClonExpress® MultiS é especificamente optimizado para reacções de recombinação de múltiplos fragmentos, que podem realizar clonagem de emendas sequenciais de até cinco inserções de cada vez. O sistema único não dependente deigas do kit reduz consideravelmente o fundo de auto-ligação do vector, e não precisa de considerar o local de clivagem enzimática transportado pela própria inserção; o tampão de reacção altamente optimizado e a recombinação melhorada Exnase MultiS podem melhorar significativamente A eficiência da recombinação do clone e a tolerância às impurezas tornam possível a utilização directa do vector linearizado e da inserção para a clonagem de recombinação sem purificação, o que simplifica muito as etapas experimentais.
Vantagens do produto
A clonagem por emenda de vários fragmentos pode ser realizada em quase qualquer posição de qualquer vector;
Não há necessidade de considerar o local de restrição transportado pela própria inserção;
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