O Ni Focurose FF (IDA) utiliza a interação entre o Ni2+ e determinados aminoácidos nas cadeias laterais das proteínas (principalmente histidina, cisteína e triptofano) para a separação e purificação. É adequado para a separação e purificação de proteínas marcadas com His e outras biomoléculas que interagem com Ni2+.
Caraterísticas
Rápido e simples (purificação numa só fase)
Ampla aplicabilidade e fácil operação, adequado para colunas de gravidade e colunas pré-embaladas (bomba peristáltica ou sistemas de cromatografia)
Múltiplas escolhas, pode quelar vários iões metálicos (tais como Cu2+, Zn2+, Fe2+, Co2+, Ca2+, etc.) para utilização
Nota: Ao quelar Ca2+, evitar a utilização de tampão fosfato (pois pode formar precipitados)
Parâmetros de desempenho
Agarose a 6% altamente reticulada
Faixa de tamanho de partícula
45-165µm
Tamanho médio das partículas (D50)
90±5µm
Capacidade de ligação
≥30 mg (proteína marcada com His)/mL (resina)
Carga de iões metálicos
≥30 μmol (Cu2+) / mL (resina)
estabilidade do pH
3-12 (longo prazo) 2-14 (curto prazo)
Estabilidade química
Evitar a utilização de agentes quelantes (tais como EDTA, EGTA) e agentes redutores (tais como DTT e DTE) em todas as soluções aquosas e tampões normalmente utilizados.
Velocidade de fluxo linear (0,3 MPa)
≥300 cm/h
Pressão de funcionamento
≤0,3MPa
Solução de armazenamento
etanol a 20%
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