A maioria de métodos usados atualmente para a determinação quantitativa da bilirrubina são baseados na reação entre a bilirrubina e o ácido sulfanilic diazotised. Na solução aquosa somente a bilirrubina direta da bilirrubina (conjugada) reagirá desse modo. Por outro lado, a fim calcular a bilirrubina total a bilirrubina unconjugated deve ser livrada do acessório à albumina e tornou solúvel em água. No método de Malloy-Evelyn o metanol é usado quando o benzoato da cafeína/sódio for usado no método de Jendrassik-Grof.
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