Fast T4 DNA Ligase é um produto enzimático único que pode ser utilizado para ligar fragmentos de ADN e adaptador no processo de construção da biblioteca NGS. O produto foi verificado através de uma sequência de alto rendimento e tem uma excelente qualidade. Esta enzima tem uma capacidade de ligação altamente eficiente, que é muito adequada para a ligação de fragmentos complexos de ácido nucleico, tal como o adaptador Ω da plataforma MGI. Recomenda-se seleccionar Hieff NGSTM Ultima DNA Ligation Module (Cat#12604), cujo componente principal é Fast T4 DNA Ligase para clientes que não necessitam de ajuste do sistema.
Definição da unidade
Num sistema de reacção de ligação 20 μL, quando 6 μg de λDNA-Hind Ⅲ reagiu em 16℃ durante 30 minutos, a quantidade de enzima necessária para dar mais de 50% de ligação dos fragmentos de ADN foi definida como uma unidade (U).
Precauções
1. O T4 DNA Ligase é sensível à desnaturação física. Ao misturar, inverter suavemente o tubo e agitar bem. Não sacudir vigorosamente;
2. As enzimas devem ser armazenadas numa caixa de gelo ou num banho de gelo quando utilizadas, e devem ser armazenadas a -20°C imediatamente após a sua utilização;
3. Este produto é para uso de investigação SOMENTE!
4. Para a sua segurança e saúde, por favor use batas de laboratório e luvas descartáveis para a operação.
Instruções
1. Os actuais kits de construção da biblioteca de ADN principal não são geralmente purificados após reparação final e tratamento A-Tailing, e efectuam directamente a ligação do adaptador. Consulte por favor a seguinte preparação para o sistema de reacção. Vortex cuidadosamente, rodar brevemente e incubar durante 15 min a 20°C.
2. A qualidade e concentração dos adaptadores utilizados afectam directamente a eficiência da ligação e o rendimento da biblioteca.
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