Rápido: 8x menos tempo prático do que os protocolos convencionais de preparação de bibliotecas 16S.
Fácil: A placa pré-misturada minimiza o tempo de trabalho e os erros de manuseamento.
Fluxo de trabalho simples: 100% pronto para automação com apenas um único passo de PCR e sem necessidade de normalização. Basta agrupar por igual volume!
DESCRIÇÃO
O Quick-16S Plus NGS Library Prep Kit (V4) é a preparação de biblioteca NGS mais rápida e simples, visando a região V4 do gene 16S rRNA para sequenciação de elevado rendimento. O protocolo de fácil automatização utiliza uma placa de amplificação pré-misturada e um único qPCR/PCR para a amplificação direccionada combinada e a adição de códigos de barras. O agrupamento por volume igual e uma única limpeza da biblioteca final, em vez de limpezas maciças baseadas em esferas AMPure®, simplifica o processo de preparação da biblioteca. Não são necessárias análises adicionais de quantificação da biblioteca, como a análise TapeStation® ou a eletroforese em gel. Com estas características, o fluxo de trabalho reduz drasticamente o tempo de preparação da biblioteca para apenas 30 minutos.
Tamanho do produto da amplificação - O tamanho final do produto da amplificação após a PCR de 1 etapa (amplificação direccionada e adição de código de barras) é de ~388 pb.
Equipamento necessário (fornecido pelo utilizador) - Microcentrifugadora, centrifugadora de placas (centrifugadora), sistema de PCR quantitativo em tempo real de 96 poços (recomendado compatível com SYBR Green) ou sistema de PCR padrão e placas de PCR em tempo real de 96 poços.
Sequências de índice - Os índices de 10 pb estão listados no modelo de folha de amostra MiSeq fornecido.
Entrada da amostra - ADN microbiano purificado (≤100 ng), isento de inibidores de PCR.
Plataforma de sequenciação - Compatível com todas as plataformas de sequenciação Illumina® utilizando primers de sequenciação personalizados. Recomendamos o kit de reagentes MiSeq® v2 (300 ciclos).
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