Kit de reagentes em solução Zymo-Seq

para preparação de bancos de DNA

Optimizado para a entrada de pequenos fragmentos: Ideal para fragmentos de ADN pequenos e danificados, como o ADN livre de células (cfDNA). Marcação exacta da metilação: O protocolo baseado na ligação direta permite leituras precisas e a identificação da metilação de terminais nativos para cada fragmento de ADN. Fluxo de trabalho simples e optimizado: Prepare bibliotecas robustas de metil-seq em apenas 3 passos. DESCRIÇÃO O kit Zymo-Seq Cell Free DNA WGBS Library Kit proporciona um fluxo de trabalho optimizado e fiável para a preparação de bibliotecas de sequenciação de bissulfito do genoma completo (WGBS) a partir de ADN livre de células (cfDNA). Este kit com tudo incluído apresenta um procedimento simples capaz de preparar bibliotecas de metil-seq de alta qualidade a partir de apenas 5 ng de cfDNA. O processo é concluído em três etapas básicas: conversão de bissulfito, ligação direta do adaptador e amplificação de PCR de índice. O tratamento inicial com bissulfito é suave para o cfDNA, mas eficaz na conversão de quaisquer citosinas não modificadas em uracilo. Em seguida, os inovadores adaptadores com fendas capturam e ligam diretamente os adaptadores compatíveis com a Illumina a fragmentos de ADN de qualquer tamanho, permitindo a sequenciação de fragmentos de ADN cortados, danificados e curtos que, de outro modo, poderiam ter sido eliminados com os métodos tradicionais de preparação de bibliotecas. A ligação direta dos adaptadores também elimina a necessidade de síntese de segunda cadeia, reparação de extremidades e passos de cauda dA, reduzindo assim o enviesamento ao preservar a integridade de qualquer metilação nativa que esteja presente nos terminais do fragmento. Por fim, o cfDNA ligado ao adaptador é indexado e amplificado através de PCR com Zymo-Seq UDIs, gerando bibliotecas que estão prontas para sequenciação em qualquer instrumento Illumina. Sequências de códigos de barras - Consulte a secção Documentos.