O kit NGS mais simples, com apenas 30 minutos de tempo prático para 96 amostras.
100% pronto para automação com apenas um único passo de PCR e sem a necessidade de normalização.
A PCR em tempo real permite a quantificação absoluta do número de cópias microbianas.
DESCRIÇÃO
O Quick-ITS Plus NGS Library Prep Kit é a preparação de biblioteca NGS mais rápida e simples que visa a região ITS para sequenciação de elevado rendimento. O protocolo de fácil automatização utiliza um único qPCR/PCR para amplificação combinada e adição de códigos de barras utilizando primers especialmente concebidos. Após o agrupamento por volume igual, é efectuada uma única limpeza da biblioteca final, em vez de limpezas maciças baseadas em esferas AMPure®. Não são necessárias análises adicionais de quantificação da biblioteca, como a análise TapeStation® ou a eletroforese em gel. Com estas características, o fluxo de trabalho reduz drasticamente o tempo de preparação da biblioteca para apenas 30 minutos.
Tamanho do produto da amplificação - O tamanho final do produto da amplificação após 1-Step PCR (amplificação direccionada e adição de código de barras) é de ~480 bp.
Sequências de códigos de barras - Códigos de barras de 10 pb, disponíveis para transferência aqui (apenas nos EUA), ou na secção Documentos como "Sequências de códigos de barras".
Primers de índice - Índice duplo (códigos de barras) para rotular amostras de forma exclusiva.
Sequências de primers ITS - (adaptadores não incluídos)
ITS3f (GCATCGATGAAGAACGCAGC, 20 pb), ITS4r (TCCTCCGCTTATTGATATGC, 20 pb).
Equipamento necessário - Microcentrífuga, centrifugador de placas (centrífuga), sistema de PCR quantitativo em tempo real de 96 poços (compatível com SYBR Green) ou sistema de PCR padrão e placas de PCR em tempo real de 96 poços.
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